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技術(shù)文章
應(yīng)用分享 | 豬肉中磺胺類藥物的檢測(cè)
作者:華譜生物 ? 時(shí)間:2023-02-10

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磺胺(對(duì)氨基苯磺酰胺)類藥物為人工合成的抗菌藥,用于臨床已近50年,它具有抗菌譜較廣、性質(zhì)穩(wěn)定、使用簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。服用可產(chǎn)生明顯的腎毒性,本類藥物可致肝臟損害,可引起黃疸、肝功能減退,嚴(yán)重者可發(fā)生肝壞死。人類長(zhǎng)期接觸,會(huì)引起干咳、食欲不振、口中有惡臭味、頭痛、頭暈、易疲乏、精神萎靡等。

本次應(yīng)用參考GB 29694-2013 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 動(dòng)物性食品中13種磺胺類藥物多殘留的測(cè)定 高效液相色譜法,使用HPSW MCX固相萃取柱進(jìn)行測(cè)定,該產(chǎn)品具有良好的水可浸潤(rùn)性和化學(xué)穩(wěn)定性,對(duì)堿性化合物有很好的保留。

一、標(biāo)液配置

磺胺甲基嘧啶,磺胺二甲基嘧啶,磺胺間甲氧嘧啶,磺胺甲惡唑,磺胺氯噠嗪準(zhǔn)使用液(50μg/mL),臨用前用乙腈配置。

二、樣品提取

豬肉:取本品約5g,精密稱定,置具塞離心管中,精密加入乙酸乙酯20ml,渦旋2分鐘,振蕩提取10分鐘,離心,5000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,取上清液于60ml氮吹管中,殘?jiān)?0ml乙酸乙酯重復(fù)提取一次,合并兩次提取液,45℃氮吹至近干。加入3ml水,3ml正己烷,渦旋1分鐘,轉(zhuǎn)移至10ml離心管中,3000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘。棄正己烷,下層液備用。圖片

HPSW MCX 聚合物基質(zhì)固相萃取柱

三、凈化

HPSW MCX(60mg/3ml)

(1)活化:5ml甲醇,5ml水;

(2)上樣淋洗:取備用液過柱,依次加入5ml水,5ml甲醇,棄去流出液。吹干小柱;

(3)洗脫:分兩次每次2ml氨水甲醇(5+95)洗脫小柱,收集洗脫液,45℃氮吹至干。加1ml乙腈-0.1%甲酸水(2+8),渦旋,過0.22μm有機(jī)濾膜,上機(jī)。

四、參考儀器條件

儀器:Waters UPLC

色譜柱:Morphling WD-C18(4.6mm×250mm,5μm)

檢測(cè)器:PDA

檢測(cè)波長(zhǎng):270nm

流速:1.0ml/min 進(jìn)樣體積:10μL 柱溫:35℃

洗脫條件:

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五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

加標(biāo)水平濃度:2mg/kg(10μg/mL)

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圖1:標(biāo)準(zhǔn)溶液圖

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圖2:樣品

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圖3:加標(biāo)圖


六、注意事項(xiàng)

肉類如果不是現(xiàn)制備現(xiàn)處理測(cè)定的話,用有機(jī)溶劑提取會(huì)出現(xiàn)成塊導(dǎo)致無(wú)法有效充分提取,本實(shí)驗(yàn)可以稱樣5g后加入5ml水,振搖使樣品分散后再加入提取液乙酸乙酯,且不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。淋洗液水可用2%甲酸水溶液代替,不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

七、產(chǎn)品訂購(gòu)信息

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